Trombositten Zengin Plazma (Tzp)’Nın Kondrosit Proliferasyonu Üzerine Etkisi Var Mı?

Abstract

Geleneksel uygulanan trombositten zengin plazmanın elde edilmesinde kullanılan ticari kitlerin birçoğunda kolajen, trombin ve CaCl2 ile aktive edilmeden hazırlanan trombositler, herhangi bir ilaç taşıma sistemi olmaksızın doğrudan hastalara uygulanmaktadır. Yarı ömürleri çok kısa olan büyüme faktörlerinin, canlı dışına alındığında dakikalar içerisinde biyoetkinliği yok olarak ölmektedir. Dahası hangi lökosit konsantrasyonuna sahip trombositten zengin plazmanın kıkırdak hasarlarında daha efektif olacağına yönelik kanıt değeri yüksek çalışma yok denecek kadar azdır. Bu yüzden bu araştırmada biyopolimerik hidrojel içerisine emdirilerek kullanılacak olan farklı lökosit konsantrasyonuna sahip trombositten zengin plazmanın; kondrosit proliferasyonu ve prekondrosit diferansiyasyon proteini olan stage pesific embryonic antigen-1 (SSEA-1) üzerine, geleneksel klinik uygulanan PRP’den daha efektif olabileceğinin moleküler düzeyde gösterilebilmesi amaçlandı. Olguların osteokondral dokularından izolasyonla, standart primer insan kondrosit kültürleri hazırlandı. Osteokondral dokusu kullanılan her bir hastaya ait otolog kan örnekleri alınarak, lökosit içeriği farklı konsantrasyonlarda olan aktive edilmiş trombositten zengin plazmalar elde edildi. Kültürize kondrositleri içeren örnekler beş ana gruba ayrıldı. Moleküler düzeyde, sadece MTT-cell viability, toksisite, proliferasyon ve stage pesific embryonic antigen-1 protein ifadeleri analizlenmedi aynı zamanda, enviromenting scanning electron ve inverted light mikroskobileri de değerlendirildi. Grupların istatistiksel olarak karşılaştırılması sonucunda, hem sağlıklı proliferasyona müsaade eden hem de SSEA-1 proteinin daha fazla ifade edildiği grubun, hidrojel içerisine düşük konsantrasyonda lökosit içeren TZP emdirilen örneklerin olduğu gözlemlendi (p=0.000). SSEA-1 seviyesi ile hücre proliferasyonu arasında korelasyonun olduğu ve bunun istatistiksel olarak anlamlı olduğu raporlandı (rho=0.745; p=0.000). Kıkırdak hasarlarının tedavisinde geleneksel uygulanan TZP yerine, düşük konsantrasyonda lökosit içeren TZP emdirilen ilaç taşıyıcı matrikslerin kullanılmasının acilen in vivo deneysel metotlarla test edilmesinin önemi vurgulandı.