KAN KÜLTÜRLERİNDE ÜREYEN ENTEROBACTERİCEAE İZOLATLARINDA GENİŞLEMİŞ SPEKTRUMLU BETA-LAKTAMAZ SIKLIĞI VE KARBAPENEMAZ VARLIĞININ ARAŞTIRILMASI

Abstract

Amaç: Enterobactericeae ailesinin üyeleri kan kültürlerinde ürediklerinde daima etken olarak kabul edilmektedirler. Genişlemiş spektrumlu beta laktamaz (GSBL) üreten çoklu ilaca dirençli Enterobactericeae izolatlarına bağlı enfeksiyonların tedavisinde karbapenemler kullanılmaktadır. Karbapenemlerin, özellikle GSBL üreten bakteriler ile oluşan ciddi enfeksiyonların tedavisinde yaygın olarak kullanılması, karbapenemaz üreten suşların ortaya çıkmasına neden olmuştur. Bu çalışmada; kan kültürlerinde üreyen Enterobacteriaceae (E. coli ve K. pneumoniae) izolatlarında GSBL sıklığı ve karbapenemaz varlığı fenotipik yöntem ve moleküler yöntem ile araştırılmıştır. Materyal ve Metot: Namık Kemal Üniversitesi Sağlık Uygulama ve Araştırma Merkezi Mikrobiyoloji Laboratuvarı’na 01.01.2013-30.04.2016 tarihleri arasında gönderilen kan örneklerinden izole edilen 56 E.coli ve 11 K.pneumoniae izolatı çalışmaya alınmıştır. İzolatların GSBL varlığı Clinical and Laboratory Standards (CLSI) önerilerine göre Kirby-Bauer disk difüzyon ve kombine disk yöntemi ile çalışılmıştır. Karbapenemaz aktivitesi ise; karbapenemlerden herhangi biri için inhibisyon zonu <28 mm olarak ölçülen izolatlarda, fenotipik yöntem olarak MASTDISCS ID ve temosilin diski kullanılarak araştırılmış ve moleküler yöntem olarak PCR ile çalışılarak sonuçlar karşılaştırılmıştır. Bulgular: Çalışmaya alınan 56 E.coli izolatının 30’u ve 11 K.pneumoniae izolatının altısında GSBL pozitifliği saptanmıştır. MASTDISCS ID ve temosilin diski ile üç E.coli izolatında metallo-beta-laktamaz (MBL), dördünde ise OXA-48 varlığı tespit edilmiştir. PCR ile MBL pozitifliği saptanmamış ancak dört izolatta OXA geni tespit edilmiş ve iki izolatın OXA tipi belirlenememiştir. Sonuç: Sonuç olarak, hastanemizde üç yıl içinde kan kültürlerinde üreyen E.coli ve K. pneumoniae izolatlarında yüksek GSBL pozitifliği (%54) saptanmıştır. GSBL pozitif beş izolattan üçünde PCR ile karbapenemaz varlığı da tespit edilmiştir. Ayrıca ülkemizde karbapenemaz olarak OXA-48 tipi yaygın olduğundan MASTDISCS ID’ nin yanında temosilin diskinin kullanılması gerekmektedir.

Aim: The members of Enterobactericeae family are always accepted as pathogenic when they are isolated from blood cultures. The carbapenems are preferred for the treatment of serious infections caused by ESBL producing multidrugresistant Enterobactericeae isolates. Carbapenems are used extensively for treatment of serious infections caused by ESBL producing bacteria, this situation leads to emerging of carbapenemase producing strains. The main purposes of this study were to investigate ESBL positivity and the presence of carbapenemase by phenotypic method and molecular method from Enterobactericeae (E.coli and K.pneumoniae) strains isolated from blood cultures. Material and Method: 56 E. coli and 11 K.pneumoniae isolates isolated from the blood samples sent to the Namık Kemal University Health Practice and Research Center Microbiology Laboratory between 01.01.2013 and 30.04.2016 were taken to the study. ESBL positivity were determined by Kirby-Bauer disc diffusion method based on suggestion of Clinical and Laboratory Standards (CLSI). The zone diameter of carbapenem; measured as <28 mm diameter of isolates then, carbapenem activity was determined by using of MASTDISCSID Carbapenemase Detection Set and temocillin disc as phenotypic methods and by using of PCR as the molecular method and the results of these methods were compared. Results: In this study, ESBL positivity for 30 of 56 E.coli and 6 of 11 K.pneumoniae isolates were detected. Metallo-betalactamase (MBL) was detected in three E. coli isolates with the MASTDISCS ID and the temocillin disc, and the presence of OXA-48 in the fourth. PCR did not detect MBL positivity but OXA gene was detected in four isolates and OXA type of two isolates could not be determined. Conclusion: As a result of this study, it was seen that the rate ESBL positivity were high for E.coli and K.pneumoniae isolates from the blood culture samples in our hospital (54%) during three years. The presence of carbapenemase were detected by PCR in three out of five ESBL positive isolates. In addition, if OXA-48 type is common as carbapenemase in your country, it is necessary to use a temocillin disc beside MAST DISCS ID.